张凤
(漯河市第三人民医院 检验科,河南 漯河 462000)
支原体是一种缺乏细胞壁、能在体外培养的原核细胞型微生物,侵入人体后,可黏附在生殖道上皮细胞上引起泌尿生殖道感染。女性感染后可引起宫颈炎、子宫内膜炎、卵巢炎、不孕,甚至导致流产、早产等[1]。随着社会的快速发展,人们生活理念和生活方式的改变,泌尿生殖道支原体感染率不断变化。近年来,关于支原体的感染性和耐药性已有很多报道,但存在较大的地域差异。本研究旨在探讨女性生殖道支原体的感染状况和药敏情况,为女性生殖道支原体感染的临床分析和治疗提供数据支持。
1.1 研究对象
收集2021年1月至2022年12月在漯河市第三人民医院妇科门诊、生殖门诊就诊女性患者的临床资料,主要包括年龄、临床表现及病原学检测结果。纳入标准:有生殖道感染的临床症状;采样前1周内未使用抗菌药物治疗。排除标准:临床资料不完整。本研究经过漯河市第三人民医院医学伦理委员会审核批准。
1.2 标本采集
女性患者常规消毒外阴,用阴道窥器扩张暴露宫颈后,用无菌棉球拭去宫颈口分泌物,然后用无菌拭子插入宫颈管内2 cm处,旋转3～5圈后置于配套的无菌试管中,立即送检。
1.3 培养鉴定及药敏试验
使用郑州安图生物生产的支原体检测试剂盒,该试剂盒可检测解脲支原体(ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原体(mycoplasma hominis,Mh),测定药物分别为米诺环素(minocycline,MIN)、多西环素(doxycycline,DOX)、红霉素(erythromycin,ERY)、阿奇霉素(azithromycin,AZI)、交沙霉素( josamycin,JOS)、甲砜霉素(thiamphenicol,THI)、克林霉素(clindamycin,CLI)、克拉霉素( clarithromycin,CLA)、罗红霉素(roxithromycin,ROX)、司帕沙星(sparfloxacin,SPA)、左氧氟沙星(levofloxacin,LEV)和加替沙星(gatifloxacin,GAT),每种药物分别包被高、低两种浓度。参照试剂说明书进行实验操作,步骤如下。(1)取出基础液及药敏试验板,平衡至室温后,吸取100 μL基础液加入空白对照孔。(2)将采样拭子置于剩余的基础液中,搅动数次,在液面上方瓶壁旋转挤压数次,弃去拭子,基础液加盖混匀。(3)将含样本的基础液加入其余的微孔中,每孔100 μL,轻轻震荡药敏试验板,使包被上的物质溶解。(4)试验板所有微孔各滴加1滴矿物油(使矿物油覆盖液面,否则培养液蒸发,结果不准)。(5)将试验板加盖后,置于35～37 ℃培养箱中,24～48 h后观察结果。(6)培养结果及药敏结果判读:孔板内试剂颜色由橘黄色变为清亮的红色,表示有支原体生长,判读结果为阳性;孔内试剂颜色保持橘黄色不变则表示没有支原体生长,判读结果为阴性。上、下两孔均为阳性判定为耐药,上孔阳性、下孔阴性判为中介,上、下两孔均为阴性判为敏感。
1.4 统计学方法
使用excel 2016和SPSS 23.0软件处理数据。计数资料以例数(n)和百分数(%)表示,采用χ2检验或Fisher精确概率法。P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 支原体检出情况
1 195例标本共检出阳性标本706例,阳性率为59.08%。其中单纯Uu感染率最高,单纯感染Mh率最低。2021年和2022年支原体感染率比较,差异无统计学意义(χ2=0.019,P=0.891),且都以Uu感染为主。见表1。
表1 支原体感染的年度分布情况[n(%)]
2.2 不同年龄组女性支原体感染情况
25～35岁为女性最佳生育年龄,35～45岁为高龄生育年龄,所以将1 195例女性分为≤25岁、>25～35岁、>35～45岁、>45岁4组,4组女性标本支原体检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。
表2 不同年龄组女性标本支原体检出情况(n,%)
2.3 药物敏感试验结果
Uu对大多数常用抗菌药物如JOS、CLA、MIN、DOX、AZI、GAT、ERY较敏感,敏感率均>80%;Mh对JOS、DOX、MIN、CLI的敏感率较高,对其他抗菌药物敏感率均较低;Uu+Mh混合感染仅对JOS、DOX、MIN的敏感率较高,对其他抗菌药物敏感率均较低。见表3。
表3 Uu、Mh、Uu+Mh药敏结果[n(%)]
2.4 2021—2022年支原体耐药情况
2021年检出7例Mh,2022年检出5例,数据较少未纳入分析。患者存在多重耐药情况。2021和2022年相比,单纯Uu感染时,对MIN、DOX、ERY、AZI、JOS、CLA、ROX、LEV耐药率较低且差异无统计学意义(P>0.05),GAT耐药率上升,差异有统计学意义(P<0.05),对THI和CLI耐药率有所下降,差异有统计学意义(P<0.05);Uu+Mh混合感染时,对MIN、DOX、JOS耐药率较低且差异无统计学意义(P>0.05),对ERY、AZI、CLA、ROX耐药率较高且差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。
表4 2021—2022年Uu和Uu+Mh耐药情况[n(%)]
支原体中的解脲脲原体和人型支原体是人类生殖道最常见的寄生菌,在机体免疫力低下等情况下可致病,是引起生殖道感染的主要病原体之一[2]。女性由于生理结构的特点,较男性更容易发生支原体感染,对女性健康及妊娠造成严重危害。
本研究中,1 195份标本中检出706份阳性标本,阳性率为59.08%,高于有关报道[2-3]。感染类型以单纯Uu感染为主(检出率为51.13%),与相关报道结果[3-4]一致。但应注意,Uu在女性下生殖道存在正常寄生的情况,是一种条件致病菌,阳性结果是否有临床意义,需要结合临床症状及半定量计数结果来解释。如果半定量计数结果>104CFU,则临床意义较大。Uu+Mh混合感染检出率6.95%,低于有关报道[4-5]。2022年女性支原体检出率同2021年相比,基本无差异,维持在59%左右,持续高检出率,也是临床一直重视支原体病原学检测的原因。4个年龄组女性支原体检出率差异无统计学意义,但>25～35岁组标本数量最多,可能是因为该年龄组处于最佳生育年龄,在生殖门诊就诊检测的女性较多。支原体感染对孕妇、胎儿均有不良影响,近年来已引起临床重视。4个年龄组女性支原体检出率均较高,可能因为支原体可通过性生活传播,而男性感染后,可因症状不明显而被忽略,所以建议支原体阳性患者的伴侣,即便无症状也应同时采集标本进行检测,如为阳性应双方同时治疗,避免一方治疗后再次重复感染。
本研究药敏试验结果显示,单纯Uu感染和Uu+Mh混合感染的药敏结果差异较大。单纯Uu感染对四环素类、大环内酯类药物有较高的敏感性,对JOS、CLA、MIN、DOX、AZI的敏感率均大于95%。单纯Uu感染对GAT的敏感性较高(81.67%),对其他氟喹诺酮类药物(LEV、SPA)敏感性较低,这与国内其他报道[6]基本一致,与其耐药机制主要与生物膜形成[7]、ParC基因突变[8]等相关。Uu+Mh混合感染对多数抗菌药物敏感率较低,但对JOS、MIN、DOX有较高的敏感性,这与国内相关的报道[9-10]一致。单纯Mh感染则对JOS、MIN、DOX、CLI有较高的敏感性。引起感染的支原体的类型不同,对抗菌药物的敏感性也不同,因此临床医生治疗支原体感染时,应根据每份标本具体的药敏结果制定用药方案。
女性生殖道支原体感染率较高,且各年龄段女性普遍易感,应引起临床重视。2021—2022年Uu和Uu+Mh对常用抗菌药物的耐药率变化不大,但由于Uu和Mh对某些抗菌药物的敏感性有所不同,临床还应根据药物敏感试验结果选择最佳药物进行治疗。
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